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近日⌒,成都新百基生物科技有限公司技术人员在对病毒核酸提取试剂盒进行质量检测?。新华社记者 刘坤摄国家药品监督管理局(以下简称国家药监局)网站显示□,根据《医疗器械应急审批程序》⊿﹡,目前已有7个新冠病毒核酸检测试剂经过应急审批π▽△。近日∵,有报道称♀,北京中日友好医院出现一名三次咽拭子检测均为阴性、通过检测下呼吸道样本才确诊为新冠肺炎的患者〇☆。为什么核酸检测结果会出现假阴性⌒?不同企业的试剂检测产品有何异同♂♀π?扩增让新冠病毒现形大多数生物体的遗传物质是DNA♂,只有少数病毒的遗传物质是RNA┊⊙☆,例如这次的新冠病毒♂。为了知道人体内是否含有新冠病毒▽π△,需要采集人体样本进行检测ππ。根据《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案(试行第五版)》π♀﹡,在鼻咽拭子、痰、下呼吸道分泌物、血液、粪便等标本中可检测出新冠病毒的RNA◇∵□。但实际上┊♂♂,样本中病毒的遗传物质极其微量⊿☆◇。而且与DNA相比﹡┊,RNA极易降解∟♀□。问题来了♀∟,样本中的RNA病毒量少又不稳定∴▽☆,怎样才能逼这只妖怪“现形”呢〇?逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR技术)就是“照妖镜”〇。该技术能将病毒的RNA合成为DNA∴┊,然后对合成DNA进行扩增〇,再通过荧光探针检测这些扩增产物▽♂。荧光探针就像雷达一样□⊿♂,一旦锁定目标就会发出信号∵⊙。扩增产物越多?,累积的荧光信号就越强┊▽。核酸检测就是通过检测荧光信号的累积来确定样本中是否有病毒核酸∴♂。目前π〇,获批的新冠病毒核酸检测试剂使用的均是RT-PCR技术♀。中国工程院院士、清华大学生物医学工程系讲席教授程京接受科技日报记者采访时表示﹡π∵,除RT-PCR这一热循环扩增技术之外▽♂□,等温核酸序列扩增技术(NASBA技术)和环介导等温扩增技术(LAMP技术)等恒温扩增技术也在分子诊断领域中扮演着重要角色△⊿♂。“目前⊿?,获批的核酸检测试剂产品都是单一指标的π▽∴,即只能用于检测新冠病毒这一种病毒♀┊。”程京坦言┊⊿♂,对于大量疑似病人来说♀⌒,这类检测试剂作用有限⌒﹡,临床上急需能一次性检测多个病原体的检测试剂产品﹡☆。审批从简但该有的流程不会少为应对突发的新冠肺炎疫情⌒∵,国家药监局迅速启动医疗器械应急审批程序☆∵,加快审评审批速度?♂□,扩大新冠病毒核酸检测试剂供给∴。在获取新冠病毒RNA序列后⌒∵,多家企业在短短几天内迅速生产出检测试剂产品⊙⌒△,并很快获批以供应前线需求┊⌒。南京医科大学公共卫生学院流行病学系教授杨蓉西撰文称〇,正常情况下◇□,核酸检测试剂从研发到临床再到拿证需要3—5年⊿〇⊿,甚至更长π↑。但紧急情况下⊙↑□,简化流程符合需要☆⌒♂。“质量检和正式临床试验可以暂时不做〇,但是基本的研发流程♂∵□,少量的预临床试验□⊙?,以及标准化生产都是需要的⊙。”2月8日◇⊙,在国务院联防联控机制召开的新闻发布会上?♂⌒,国家药监局器械注册司稽查专员江德元对有关核酸检测试剂有效性的质疑作出回应☆。他表示?♀↑,已批准的产品都有相应的临床使用实验△♂♀,完成了产品的注册检验⊙∴,质量管理体系检查┊,提交了临床评价资料和相应的研究资料┊△,经过严格的审批程序⊙♀。相关资料表明↑∴,产品性能能够达到技术要求的规定┊⌒π,产品安全性、有效性和质量可靠性可以得到保障∟。程京也告诉记者:“检测试剂还要通过3家以上独立医学机构的临床样本检测并出具临床试验报告┊♀。中国食品药品检定研究院也会测试产品性能↑∴⊿,给出鉴定报告∴☆,判定检测试剂产品是否满足安全性、可靠性、有效性⊙▽。满足不了这些硬性指标∴♀,检测试剂在实验室的效果再好▽▽,也不会拿到注册批文⊙。”也就是说☆,虽然特事特办〇,但国家药监局还是遵循“统一指挥、早期介入、随到随审、科学审批”的原则π,确保产品安全、有效、质量可控◇♂。多种因素导致检测结果有偏差有疫情一线的医生反映〇┊□,一些患者核酸检测结果为阴性⊙☆□,但CT影像却显示为新型冠状病毒肺炎﹡∴,病情也在不断发展△。“当前?△△,用核酸检测新冠肺炎敏感性即阳性率只有30%—50%π♂,假阴性带来的漏检是个大问题∴?。”丹娜(天津)生物科技有限公司首席科学家周泽奇告诉科技日报记者π↑。为何核酸检测结果会出现假阴性〇△△?程京在采访中表示┊☆┊,这可能由多种因素导致∴。“首先∴,试剂盒研发需要十几种关键化学原材料⊿﹡,比如酶、合成DNA等▽。不同企业选择的原材料供货方不同π?⊿,酶的活性、DNA的纯度就会有差别☆∟,这都会影响到核酸检测试剂的准确度〇?〇。”程京说﹡☆。“而在试剂盒产品研发过程中⌒π,原材料制备、生产工艺选择、研发人员能力、技术手段使用⌒♂﹡,每一个环节都有可能产生偏差∵,误差累计起来也会导致试剂盒产品灵敏度出现差别∴〇。”程京说♀。再者◇↑,取样过程不规范也会影响后续的分离和测定结果〇△。以使用最普遍、操作简单的咽拭子采集为例⌒,由于咽部的新冠病毒含量少∵┊,所以有可能造成漏检∴◇⊙。“虽然只是在咽部拿棉签划几下△,但如果没有良好的专业实操技能▽∴☆,样本的采集部位和手法可能不符合规范﹡♂⌒,就可能直接影响检测结果⊙。”程京表示⊿▽,此外♀,刚被感染的病人因体内带毒数量有限♀♂↑,也可能出现检测结果为阴性☆┊。送样本时必须采取冷链运输∴,如果在运送过程中样本受损△△,也会影响检测结果﹡♂。核酸检测出现假阴性的问题☆,一度引发用CT影像代替核酸检测试剂确诊新冠肺炎的呼声△∵?。近日发布的《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案(试行第五版)》中☆⌒,在“疑似病例”和“确诊病例”之外新增了一个“临床诊断病例”∴∵♀,并将“疑似病例具备肺炎影像特征者”作为其诊断标准(只限于湖北省之内)∵┊,这也意味着CT影像结果成了“临床诊断病例”的判定依据▽┊。浙江大学附属第二医院放射科主任医师、中国医师协会放射医师分会呼吸专委会主任委员张敏鸣教授曾指出△♂?,CT影像结果阳性也存在误诊可能∵▽。他还提到☆┊◇,如果都去做CT检查而忽略防护♂□∵,容易造成交叉感染↑。专家表示△┊π,无论是CT检查还是核酸检测↑﹡△,都不能保证绝对的准确性☆。“尽管核酸检测存在假阴性问题﹡∵◇,但核酸检测是病原诊断的一个依据∵,也是目前确诊的最重要依据⊙♀。”国家医疗专家组成员、北京大学第一医院感染疾病科主任王贵强表示﹡▽。成都一女子4次检测阴性第5次被确诊 专家:属个例1月26日▽∴,49岁的四川成都人李丽(化名)和丈夫在攀枝花与友人聚餐┊,并于1月30日自驾返回成都

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本文来源:科技日报

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